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    外標法檢測樣品中柚皮苷含量

    點擊次數:3087 發布時間:2013-05-24

    一、實驗方法

    Cometro液相色譜系統;

    色譜柱:Comasil C18 250*4.6mm5μm

    流動相:甲醇-=40:60

    紫外檢測器波長283nm

    流速:1.0ml/min

    樣品:柚皮苷對照品19.68μg/ml,樣品;

    進樣量:對照品分別進樣2.5μl4μl5μl6μl7.5μl5次,樣品進樣5μl,使樣品與標準品5:1混合再進樣5μl,考察線性相關性,保留時間重現性,峰面積重現性,回收率。

    二、實驗結果與分析

    1對照品5μl

    Channel A Results

    Name

    Retention Time

    Area

    Theoretical plates (USP)

    Resolution (USP)

    Asymmetry

    柚皮苷

    18.477

    89103

    8137

    0.00000

    1.09209

     

    附進樣量,保留時間,峰面積關系表:

    進樣量/μl

    保留時間/min

    峰面積/mV*min

    2.5

    18.386

    42387

    4

    18.377

    71244

    5

    18.477

    89103

    6

    18.539

    106504

    7.5

    18.501

    134769

     

     

    2樣品5μl

     

    Channel A Results

    Name

    Retention Time

    Area

    Theoretical plates (USP)

    Resolution (USP)

    Asymmetry

    柚皮苷

    19.497

    128002

    8087

    5.22515

    1.05546

     

    3樣品與標準5:1混合后進樣5μl

     

    Channel A Results

    Name

    Retention Time

    Area

    Theoretical plates (USP)

    Resolution (USP)

    Asymmetry

    柚皮苷

    18.535

    120336

    7828

    2.87114

    1.03257

     

     

    三、結果運算

    1保留時間重現性考察

    保留時間

    18.386

    18.377

    18.477

    18.539

    18.501

    RSD

    0.3747%

     

    2峰面積重現性考察

    峰面積

    89103

    89105

    88953

    RSD

    0.0979%

     

    3線性相關性考察及樣品含量計算

    以進樣量為橫坐標,峰面積為縱坐標,得線性方程:

    由此可算出樣品含柚皮苷28.08μg/ml

    4回收率考察:

    根據上面線性方程可算出混合后樣品含柚皮苷26.43μg/ml而實際真值是26.68μg/ml,因此得回收率為99.06%

    四、綜述

    此四項考察綜合考察了檢測器的吸收穩定性,泵的流量性,進樣、進樣針的性,Comasil色譜柱的性。

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